硫酸铵是由氢氧化铵和硫酸中和后,结晶、离心分离并干燥而得。中和法氨与硫酸约在100℃下进行中和反应,生成的硫酸铵晶浆液经离心分离、干燥,制得硫酸铵成品。其2NH3+H2SO4→(NH4)2SO4回收法由炼焦炉气回收氨气,再与硫酸进行中和反应而得。
食品级硫酸铵,生物学上的用途也很多,多用于蛋白纯化工艺方面,因为硫酸铵属于惰性物质,不易与其他生物活性物质发生反应,在纯化过程中能保护蛋白活性,另外,硫酸铵的可溶性好,能形成高盐环境,对于蛋白沉淀与后续的高盐纯化做准备。
1.硫酸铵沉淀机理为:蛋白质在溶液里面溶解度和盐浓度有关系。在低盐浓度下,如果增加盐浓度,会增强蛋白质的溶解,这是因为,盐的离子与蛋白质表面的正负电荷配对,减少了蛋白质电荷表面相互作用的机会。当盐浓度高到一定程度的时候,过多的盐会跟蛋白质疏水表面争夺水分子,以至于蛋白质疏水表面倾向于相互作用形成聚合物沉淀下来。
2.把目的蛋白沉淀下来的佳浓度,完全是靠经验的,而且实验的每次也不一定重复,因为能否沉淀蛋白和自己本身的浓度液有关系。
3.有一个很简单的方法可以用来估计蛋白质沉淀所需硫酸铵的浓度。把样品分成五份,每份分别加硫酸铵至20%,30%,40%,50%,60%,离心去掉沉淀,保留上清,再向上清里面添加硫酸铵使浓度从20%到30%,30%到40%,40%到50%,50%到60%,60%到70%,离心保留沉淀,然后分析沉淀里的蛋白,就能找到目的蛋白在哪里了。
操作注意事项:密闭操作,局部排风。操作人员必须经过专门培训,严格遵守操作规程。建议操作人员佩戴自吸过滤式防尘口罩,戴化学安全防护眼镜,穿防毒物渗透工作服,戴橡胶手套。避免产生粉尘。避免与酸类、碱类接触。搬运时要轻装轻卸,防止包装及容器损坏。配备泄漏应急处理设备。倒空的容器可能残留有害物。
储存注意事项:储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。应与酸类、碱类分开存放,切忌混储。储区应备有合适的材料收容泄漏物。
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